聯系電話:
18502669006
大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒免費代測本生生物公司供應:ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器。
本試劑盒僅供研究使用
檢測范圍: 96T
使用目的:
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中蛋白激酶B(PKB)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠蛋白激酶B(PKB)水平。用純化的蛋白激酶B(PKB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加蛋白激酶B(PKB),再與HRP 標記的蛋白激酶B(PKB)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蛋白激酶B(PKB)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中蛋白激酶B(PKB)濃度。
試劑盒組成:
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標試劑 6ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標準品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份
11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個
標本要求
1. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2. 不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
60 ng/L5 號標準品150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液
30 ng/L4 號標準品150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
15 ng/L3 號標準品150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
7.5 ng/L2 號標準品150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
3.75 ng/L1 號標準品150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,
然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。
大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒免費代測
操作程序總結:
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,
即為樣品的實際濃度。
大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA檢測試劑盒注意事項
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1. 試劑盒保存:;2-8℃。
2. 有效期:6 個月
大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA檢測試劑盒相關產品推薦:
BS-2972 | 大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒 |
BS-2973 | 大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 |
BS-2974 | 大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒 |
BS-2975 | 大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 |
BS-2981 | 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 |
BS-2982 | 大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒 |
BS-2983 | 大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒 |
BS-2985 | 大鼠基質金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒 |
BS-2986 | 大鼠基質金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 |
BS-2987 | 大鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒 |
BS-2988 | 大鼠基質金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒 |
BS-2989 | 大鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒 |
BS-2990 | 大鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 |
BS-2991 | 大鼠骨保護素(OPG)ELISA試劑盒 |
BS-2992 | 大鼠B因子(BF)ELISA試劑盒 |
BS-2993 | 大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒 |
BS-2994 | 大鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒 |
BS-2995 | 大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒 |
BS-2996 | 大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒 |