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大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-3658 天津本生大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒
大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒的實驗使用說明書主要包括以下內容:
1. ?實驗原理?
該試劑盒采用雙抗體夾心法測定標本中大鼠Klotho蛋白(Klotho)水平。通過純化的大鼠Klotho蛋白抗體包被微孔板,形成固相抗體,依次加入Klotho蛋白和HRP標記的Klotho蛋白抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。經過洗滌后,加入底物TMB顯色,顏色深淺與樣品中Klotho蛋白含量呈正相關。最后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品濃度?。
2. ?試劑盒組成?
30倍濃縮洗滌液:20ml×1瓶
酶標試劑:6ml×1瓶
標準品:2瓶
稀釋液:1×45mL
檢測溶液A:1×120μL
檢測溶液B:1×120μL
TMB底物:1×9mL
終止液:1×6mL
96孔板(預包被):1塊
96孔板覆膜:2張
使用說明書:1份?。
3. ?樣本處理及要求?
血清?:全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,1000×g離心20分鐘,取上清,避免反復凍融?。
血漿?:使用EDTA或肝素抗凝,采集后30分鐘內于2-8℃離心,取上清?。
細胞上清液?:3000轉離心10分鐘去除顆粒?。
組織勻漿?:將組織加入適量生理鹽水搗碎,離心后取上清?。
4. ?實驗步驟?
加樣:標準品及樣本各50μL,37℃孵育30分鐘?。
洗滌:洗板5次,加入酶標試劑50μL,37℃孵育30分鐘?。
顯色:加入顯色液A、B各50μL,37℃孵育15分鐘?。
終止:加入終止液50μL,立即用酶標儀在450nm波長下測定吸光度?。
5. ?注意事項?
試劑盒需在2-8℃保存,開封后酶標板需密封保存于-20℃?。
實驗過程中需避免樣本反復凍融,確保操作環境溫度、濕度一致?。
試劑盒有效期一般為6個月至12個月,具體以標簽為準?。
6. ?適用范圍?
該試劑盒適用于體外定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中Klotho蛋白的含量?。
以上內容綜合了多個來源的實驗使用說明書,確保實驗操作的準確性和可靠性?。