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elisa實驗:引起酶免反應顯色淡,靈敏度偏低的原因
引起酶免反應顯色淡、靈敏度偏低有很多種因素,下面BUNSEN本生小編給大家介紹幾種可能的較常見的原因:
1. 試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高;要求運輸時置于保溫箱內運輸,并放足夠數量的冰塊,盡量縮短運輸時間。
2. 試劑盒超過有效期;建議不要使用超過效期的試劑盒。
3. 試劑、樣品使用前未能平衡;建議使用前于室溫平衡30分鐘左右。
4. 試劑開啟時間過長,長菌;建議試劑開啟后應該于半個月內用完。
5. 移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸頭內壁掛液太多或內壁不清潔。建議使用一次性的吸頭。
6. 恒溫箱溫度不足37℃ (或水浴鍋溫度不足37℃);建議孵育反應期間應該控制好溫度。
7. 孵育反應時間不足;建議應準確記時。
8. 洗滌時沖擊力太大,洗滌液浸泡時間太長,洗滌次數增加。建議減少洗滌沖擊力,按說明書要求的時間,準確記錄洗滌時間。
9. 顯色劑滴加量不足或順序顛倒,或混合后加入;建議應該先加顯色劑A,后加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入。
10. 顯色劑反應時間不足;建議準確記時。
11. 蒸餾水水質有問題;建議檢查蒸餾水。
12. 樣品用疊氮鈉防腐,抑制了酶的反應;建議不能加疊氮鈉防腐。
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