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BUNSEN本生:胎牛血清如何正確存放與解凍?
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
胎牛血清在科研市場上應用廣泛相信大家都知道。但對于胎牛血清的使用及保存,并不是所有人都那么清楚,BUNSEN本生小編就以胎牛血清的儲存、常見問題及處理方法進行分析!
一. 如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?
未拆封的血清,一般情況下應存放于-10℃至-20℃,在產品規定的效期內均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內,再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。溶解后建議盡快使用,若長時間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。
二. 血清中絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
1. 將冷凍保存的血清取出后,置4℃冰箱靜止過夜;
2. 待血清融化后,上下顛倒,輕輕混勻,繼續4℃2-3小時;
3. 輕輕吸取上層血清,分裝,余底下50ml左右;
4. 低速離心5分鐘,去掉沉淀。
三. 若解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該怎么處理?
胎牛血清中沉淀物的出現有許多種原因,但的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質量。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將胎牛血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
解凍胎牛血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。解凍胎牛血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。請勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會變得混濁,同時胎牛血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響胎牛血清的質量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。
四. 如何避免血清中產生沉淀?
1. 解凍時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一;
2. 分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡);
3. 切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍,較大的溫差,易造成蛋白質凝結而發生沉淀;
4. 切勿將血清置于37℃過長時間,否則可能使之渾濁,其中一些不穩定的組分也會因此受到影響,最終降低血清的品質;
5. 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟;
6. 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且保持搖晃均勻。溫度過高、時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
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